Общая информация

Иммуноцитохимическая диагностика

Иммуноцитохимическая диагностика — это двойной прогностический диагностический тест, который оценивает p16INK4a и  Ki67 Клеточная экспрессия белков в цервико-вагинальном (слизистая оболочка шейки матки и влагалища) образце. Чувствительность теста составляет 94%, а специфичность — 97% при оценке риска развития высокодифференцированного эпителия шейки матки.

Белок p16INK4a участвует в процессе контроля клеточного цикла и деления клеток.

В нормальных условиях белок p16INK4a выполняет функцию подавления опухоли, блокируя неконтролируемое размножение клеток шейки матки, инфицированных вирусом папилломы.

Стойкие инфекции ВПЧ продуцируют онкопротеины, которые в конечном итоге приводят к геномной нестабильности и неконтролируемой пролиферации поврежденных эпителиальных клеток.

Повышенная экспрессия белка p16INK4a является маркером начала раковой трансформации клеток, инфицированных ВПЧ, и соответствует предраковому состоянию шейки матки.

Белок Ki67 является маркером пролиферации клеток и вырабатывается в ядре клетки, находящейся в процессе деления. Повышенная экспрессия белков p16INK4a и Ki67 в одной и той же клетке указывает на нарушение клеточного цикла и высокую онкогенную активность вируса папилломы человека (ВПЧ). Кольпоскопическое обследование такого пациента является необходимым.

Рекомендация по иммуноцитохимическому исследованию  Данный:

• Все пациенты с интраэпителиальным поражением шейки матки низкой степени
• Пациенты с высокорискованными типами ВПЧ

Подготовка пациента

• За 24–48 часов до взятия образца запрещается: половой акт, спринцевание, манипуляции, использование вагинальных препаратов, дезинфицирующих средств и лубрикантов.
• Образец следует собирать между менструальными кровотечениями. При наличии инфекции образец берут после курса лечения.
• При необходимости проведения медико-хирургических процедур образец влагалища следует взять перед ручным исследованием или в течение 24 часов после кольпоскопии. Интервал между электрорезекцией, полипэктомией или родами и процедурой должен составлять 1,5–3 месяца.

Сбор материалов

Сбор образцов осуществляется с помощью пробирки и щеточки, предназначенных для жидкостной цитологии, что позволяет производить сбор без потерь и транспортировать материал в неповрежденном виде.

Иммуноцитохимические исследования проводятся в полностью автоматизированной системе, позволяющей одновременно обнаруживать оба белка.

Этапы обработки образцов включают извлечение антигена, инактивацию эндогенных пероксидаз (ферментов), инкубацию и проведение двух иммуноцитохимических реакций, которые визуализируются двумя разными цветами. Обработанные препараты исследуются с помощью оптического микроскопа независимо от морфологии клеток.

Интерпретация результатов

Результат иммуноцитохимического теста CIN2+ (CINtec® PLUS) считается положительным, если хотя бы в одной клетке наблюдается одновременная экспрессия белков p16INK4a и Ki67.

Повышенная экспрессия белка p16INK4a определяется коричневым окрашиванием, а повышенная экспрессия белка Ki-67 определяется красным окрашиванием. Двойной цитохимический сигнал (обнаружение пятен, указывающих на оба типа повреждений)

Двойной иммуноцитохимический сигнал (выраженный двумя цветами) свидетельствует о нарушении регуляции жизненного цикла клеток и изменениях в геноме, что является показателем высокого риска повреждения.